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發(fā)布時(shí)間:2018-08-30發(fā)布者:高效液相色譜檢測器
高效液相色譜檢測器最常用的為紫外檢測器,包括二極管陣列檢測器,其他常見(jiàn)的檢測器有熒光檢測器、蒸發(fā)光散射檢測器、示差折光檢測器、電化學(xué)檢測器和質(zhì)譜檢測器等。
紫外、熒光、電化學(xué)檢測器為選擇性檢測器,其響應值不僅與供試品溶液的濃度有關(guān),還與化合物的結構有關(guān);蒸發(fā)光散射檢測器和示差折光檢測器為通用型檢測器,對所有的化合物均有響應;蒸發(fā)光散射檢測器對結構類(lèi)似的化合物,其響應值幾乎僅與供試品的質(zhì)量有關(guān);二極管陣列檢測器可以同時(shí)記錄供試品的吸收光譜,故可用于供試品的光譜鑒定和色譜峰的純度檢查。
紫外、熒光、電化學(xué)和示差折光檢測器的響應值與供試品溶液的濃度在一定范圍內呈線(xiàn)性關(guān)系,但蒸發(fā)光散射檢測器的響應值與供試品溶液的濃度通常呈指數關(guān)系,故進(jìn)行計算時(shí),一般需經(jīng)對數轉換。
不同的高效液相色譜檢測器,對流動(dòng)相的要求不同。如采用紫外檢測器,所用流動(dòng)相應符合紫外-可見(jiàn)分光光度法(2010年版藥典二部附錄ⅣA)項下對溶劑的要求;采用低波長(cháng)檢測時(shí),還應考慮有機相中有機溶劑的截止使用波長(cháng),并選用色譜級有機溶劑。蒸發(fā)光散射檢測器和質(zhì)譜檢測器通常不允許使用含不揮發(fā)性鹽組分的流動(dòng)相。
流動(dòng)相
反相色譜系統的流動(dòng)相首選甲醇-水系統(采用紫外末端波長(cháng)檢測時(shí),首選乙腈-水系統),如經(jīng)試用不適合時(shí),再選用其他溶劑系統。應盡可能少用含有緩沖液的流動(dòng)相,必須使用時(shí),應盡可能選用含較低濃度緩沖液的流動(dòng)相。由于C18鏈在水相環(huán)境中不易保持伸展狀態(tài),故對于十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相的反相色譜系統,流動(dòng)相中有機溶劑的比例通常應不低于5%,否則C18鏈的隨機卷曲將導致組分保留值變化,造成色譜系統不穩定。
各品種項下規定的條件除固定相種類(lèi)、流動(dòng)相組分、高效液相色譜檢測器類(lèi)型不得改變外,其余如色譜柱內徑、長(cháng)度、載體粒度、流動(dòng)相流速、混合流動(dòng)相各組分的比例、柱溫、進(jìn)樣量、檢測器的靈敏度等,均可適當改變,以適應供試品并達到系統適用性試驗的要求。其中,調整流動(dòng)相組分比例時(shí),以組分比例較低者(小于或等于50%)相對于自身的改變量不超過(guò)±30%且相對于總量的改變量不超過(guò)±10%為限,如30%相對改變量的數值超過(guò)總量的10%時(shí),則改變量以總量的±10%為限。
本文關(guān)鍵詞:高效液相色譜檢測器 高效液相色譜檢測器有哪些
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